传统的PCR检测试剂一般由反应液、酶液及引物探针组成，通常以“A+B”的形式提供两个试剂管或将其中两者混合为一个管。然而，这种操作方式在实际应用中存在复杂性，容易出错，对操作人员的技巧有一定要求。此外，试剂需要“现配现用”，配制过程中产生的浪费与污染隐患不容忽视。虽然传统PCR试剂在常规检测中尚可勉强使用，但随着新冠病毒普筛的推广及各大品牌在国际市场的扩展，分子市场对RNA一管式液体全预混反应液的需求愈加迫切，即将反应液、酶液、引物探针预混于同一管中以优化操作流程。

RNA全预混反应液的推出，将有效避免客户终端的繁琐配制操作，降低错误率，提高稳定性，有利于国际推广与运输。然而，目前市场上尚未出现一种具有广泛适应性的稳定RNA全预混原料。虽然行业内少数企业已尝试搭建RNA全预混项目，但其试剂的稳定性依然令人担忧，且适用范围狭窄。这些产品往往在提高快速检测性能方面做出妥协，或为特定项目量身定制，缺乏普适性。

在全预混反应体系中，除了模板以外的所有成分（如酶、镁离子、dNTPs以及引物探针）均需提前混合。然而，在长期保存过程中，引物之间及引物与探针之间可能形成二聚体或二级结构，导致非特异性扩增，增加体系复杂性，从而影响后续主反应的进行，并消耗必需的反应成分。结果导致扩增曲线的荧光强度降低、Ct值滞后或出现Ct值提前的现象，显著增加假阳性的发生率。虽然减少各成分的用量有助于短期提升试剂稳定性，但会影响其性能，尤其是在快速检测方面，此做法并不可取。

当前RNA全预混的主要技术瓶颈存在于以下三个方面：首先，功能性酶液的活性封闭不完全，例如Taq DNA聚合酶的聚合和切割活性没有被完全抑制，逆转录酶在低温及室温下的活性也未被完全封闭；其次，长期保存期间酶液的活性显著下降或失活，从而影响全预混试剂的性能；最后，引物探针的长期保存及加速过程中，可能导致引物二聚或引物与探针间的二级结构形成，增加反应体系的复杂性，进而影响试剂的稳定性。构建一种稳定且普遍适用于RNA一管式液体全预混反应液（MIX）的方案，是分子诊断行业面临的重大挑战。

为解决这一行业难题，尊龙凯时积极研发RNA全预混试剂，进行全面的验证和优化，涵盖Taq DNA聚合酶、热启动逆转录酶、反应体系及耗材等多个方面。首先，强化Taq DNA聚合酶的热启动特性，确保其聚合和切割活性在反应前彻底封闭，并在反应时迅速失活；其次，针对热启动逆转录酶进行研发，在低温或常温下基本封闭其活性，同时提升其稳定性；此外，通过设计实验优化反应体系，减少引物探针间的二级结构形成，提高检出率；最后，借助对比测试选定适用于此同时的耗材，确保反应环境的稳定性。

同时，尊龙凯时还深入研究早期二聚体的抑制，确保试剂的长期稳定性与卓越性能。为了更好地满足客户需求，提升试剂的性能与适配性，尊龙凯时建立了涵盖呼吸道、血液、肠道、兽用等多个领域、超过百个靶标的测试体系和严格的评估标准，不断优化RNA全预混试剂的各项性能。

目前，尊龙凯时的RNA全预混试剂已成功突破技术瓶颈，在37°C条件下可维持稳定性达10天，具有广泛适配性，可直接匹配市场上大多数项目，确保在高灵敏度与兼容快速程序的前提下展现出市场上最佳的稳定性。此举为客户提供了优秀的产品，有助于搭建快速、高灵敏且易于操作的检测试剂。目前，RNA全预混已通过多家国内知名企业的内部测试，成为国内首家能够大规模供应广泛适配RNA全预混试剂的企业。

在甲型流感病毒、乙型流感病毒及呼吸道合胞病毒混合检测项目中，尊龙凯时与竞争对手的全预混试剂在37℃的加速测试中表现卓越，确保了实验结果的可靠性。未来，尊龙凯时将继续致力于提供优质的RNA全预混相关产品与服务，包括RNA全预混试剂（可立管及预分装版本）、DNA全预混试剂、全预混热启动Taq DNA聚合酶及逆转录酶。同时，还将为客户提供试剂定制调优、引物探针定向设计等CRO服务。